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7 .6 .4
"De lta d e lta C
Q u a n tifizie ru n g n a ch d e r De lta -De lta -CT-
Me th o d e ")
Die Delta -Delta -C
expressionsa na lyse. Sie wurde von Liva k und Schmittgen
(2001)* beschrieben.
Bei dieser Methode müssen nicht für jeden La uf Sta nda rd-
kurven erstellt werden. Jede Probe wird zuerst durch Ver-
gleich mit dem Referenzgen a uf die Menge a n zugegebener
Templa te-DNA norma lisiert. Diese norma lisierten Werte
werden da nn rela tiv zu einem Ka libra tora nsa tz norma lisiert.
Der Ka libra tor könnte zum Beispiel eine unbeha ndelte
Wildtyp-Kontrolle oder eine Probe zum Zeitpunkt null sein.
Zwingende Vora ussetzung ist, da ss die Amplifika tions-
effizienzen für da s zu untersuchende Gen und da s Referenz-
gen identisch sind und dies gemä ß den Richtlinien von Liva k
und Schmittgen va lidiert ist.
Es ist a ußerdem essenziell wichtig, da ss die Proben im "Edit
Sa mples"-Fenster korrekt bena nnt werden, und dieselben
Proben in jeder Ana lyse einer zusa mmengesetzten Q ua nti-
fizierung identisch bena nnt sind.
1. Werten Sie die Da ten mithilfe der "Q ua ntita tion"-
2. Wä hlen Sie von der "O ther"-Registerka rte („Andere") des
* Liva k, K.J. a nd Schmittgen, T.D. (2001) Ana lysis of rela tive gene expression
da ta using rea l-time qua ntita tive PCR a nd the 2^ [–delta delta C(T)] method.
Methods 2 5 , 402 .
Rotor-Gene Q MDx Handbuch 09/201 8
Darin ist:
=
cv
re la tive q u a n tita tio n " („Re la tive
T
-Methode ermöglicht die rela tive Gen-
T
Registerka rte a us. Na chdem eine Va lidierung durchge-
führt wurde, ist die Erstellung einer Sta nda rdkurve im
selben La uf nicht mehr erforderlich.
"Ana lysis"-Fensters die Methode "Delta Delta C
Q ua ntita tion" („Rela tive Q ua ntifizierung na ch der Delta -
Analyse -Be n u tze ro b e rflä ch e
s
stddev
=
meanvalue
X
Rela tive
T
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