Funktionsprinzip - Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000-Serie Bedienungsanleitung

UltiMate 3000 Serie:
Diodenarray-Detektoren DAD-3000(RS) und MWD-3000(RS)

2.2 Funktionsprinzip

Die photometrische Detektion basiert auf der Absorption von monochromatischem Licht.
Dabei wird der Grad der Absorption von den Probenmolekülen, ihrer Konzentration, der
Weglänge des Lichts in der Probe und der Messwellenlänge bestimmt.
Die Definition erfolgt nach dem Lambert-Beer-Gesetz und ist dimensionslos:
A
Dabei ist:
Molarer Extinktionskoeffizient des Analyten (L • mol

c
Konzentration des Analyten (mol/L)
l
Weglänge des Strahlengangs der Messzelle (cm)
Lichtintensität bei der Referenzwellenlänge
Lichtintensität bei der Messwellenlänge
Lichtintensität bei der Referenzwellenlänge bei Autozero
Lichtintensität bei der Messwellenlänge bei Autozero
In der UV-Vis-Spektroskopie gibt es die Möglichkeit, Chromophore von Analytmolekülen
direkt in einer Probe zu detektieren oder Chromophore indirekt durch Derivatisierung zu
erzeugen. Eine Liste der Wellenlängen von Absorptionsmaxima verschiedener Chromo-
phore finden Sie im Kapitel 10 (→ Seite 127).
Wie in Abb. 1 (→ Seite 13) gezeigt, wird der Lichtstrahl der Wolframlampe (Nr. 1) über eine
Linse (Nr. 2) auf das Durchgangsloch der Deuteriumlampe (Nr. 3) gebündelt. Das
kombinierte Licht beider Lichtquellen gelangt dann über einen Achromaten (Nr. 4) durch die
Messzelle (Nr. 5). Nach dem Austritt aus der Messzelle wird das Licht über eine Linse (Nr.6)
auf den Eingangsspalt (Nr. 8) gebündelt. Über einen Motor kann in diesen Teil des
Strahlengangs das Filterrad (Holmiumoxidfilter, Dunkelstellung) gefahren werden. Durch den
Eingangsspalt gelangt das Licht auf das optische Gitter (Nr. 9), wo es in die verschiedenen
Wellenlängen aufgefächert wird. Die Messung des Lichts erfolgt im Photodioden-Array
(Nr. 10). Jede Diode erfasst einen schmalen Bereich des Spektrums. Durch Messen der
Lichtintensität auf den einzelnen Dioden und Zusammenstellen der Ergebnisse des gewählten
Wellenlängenbereichs ergibt sich ein Spektrum.
Seite 12

 
ε
cl
= = log


 
I
 
 
so − log

I



s
-1 -1
• cm


I
 
ro

I


r
)
Bedienungsanleitung