Thermo Scientific NanoDrop One Bedienungsanleitung Seite 81

Die Gleichung auf der rechten Seite zeigt die Beziehung
zwischen dem molaren Extinktionskoeffizient (
und dem Prozent-Extinktionskoeffizient (
Zum Bestimmen der Konzentration (c) einer Probe in
mg/ml verwenden die Gleichung auf der rechten Seite
und einen Umrechnungsfaktor von 10.
Tipp: Die NanoDrop One-Software enthält den
Umrechnungsfaktor beim Ausweisen von
Proteinkonzentrationen.
Thermo Scientific
Umwandlungen zwischen
ε
)
ε
ε molar
(
1 %).
Beispiel: Zum Ermitteln des Prozentlösung-Extinktionskoeffizienten
ε
( 1 %) für ein Protein, das einen molaren Extinktionskoeffizienten von
43.824 M
aufweiset, stellen Sie die oben stehende Gleichung wie folgt um und lösen
auf:
ε
1 % = (
ε
1% = (43.824 * 10) / 66.400 Da)
ε
1 % = 6,6 g/100 ml
Umwandlungen zwischen g/100 ml und mg/ml
C
Protein
Beispiel: Wenn die gemessene Extinktion für eine Proteinprobe bei 280 nm
relativ zur Referenz 5,8 A beträgt, kann die Proteinkonzentration wie folgt
berechnet werden:
C
Protein
C
Protein
C
Protein
ε
molar
ε
) * 10 = ( 1 %) * (MW
molar
-1 -1
cm und eine Molekülmasse (MW) von 66.400 Daltons (Da)
ε
* 10) / (MW
molar
in mg/ml = (A /
ε
= (A / 1 %) * 10
= (5,8/6,6 g/100 ml) * 10
= 8,79 mg/ml
NanoDrop One Bedienungsanleitung
Messen von Protein E280
ε
uand 1 %
)
Protein
)
Protein
ε
1 %) * 10
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