Optika Italy B-510 Serie Bedienungsanleitung Seite 41

Gli obiettivi da microscopio progettati per l'uso con l'olio per immersione hanno una serie di vantaggi rispetto
a quelli utilizzati a secco. Gli obiettivi di immersione sono tipicamente di correzione superiore (fluorite o
apocromatica) e possono avere aperture numeriche funzionanti fino a 1.40 quando vengono utilizzati con olio ad
immersione avente la dispersione e la viscosità appropriate. Questi obiettivi consentono di aprire il diaframma
del condensatore in misura maggiore, estendendo così l'illuminazione del campione e sfruttando l'apertura
numerica aumentata.
Un fattore che viene comunemente trascurato quando si usano obiettivi ad immersione in olio di apertura
numerica aumentata sono le limitazioni poste sul sistema dal condensatore.
In una situazione in cui un obiettivo ad olio con NA = 1.40 viene utilizzato per osservare un campione con un
condensatore di apertura numerica più piccola (1.0 per esempio), l'apertura numerica inferiore del condensatore
sovrascrive quella dell'obiettivo e la NA totale del il sistema è limitata a 1.0 (l'apertura numerica del condensatore).
I moderni condensatori presentano spesso un alto grado di correzione con valori di apertura numerica compresi
tra 1.0 e 1.40. Per utilizzare efficacemente tutti i benefici dell'immersione in olio, l'interfaccia tra la lente frontale
del condensatore sotto il tavolino e la parte inferiore del vetrino del microscopio contenente il campione deve
essere immersa in olio.
Un sistema ideale è schematicamente visualizzato in Fig. 21, dove l'olio di immersione è stato posizionato alle
interfacce tra la lente frontale dell'obiettivo e
il vetrino del campione e anche tra la lente
frontale del condensatore e la parte inferiore
del vetrino del campione.
Questo sistema è stato definito un sistema
di immersione omogenea ed è la situazione
ideale per ottenere la massima apertura
numerica e la risoluzione in un microscopio
ottico.
In questo caso, l'indice di rifrazione e la
dispersione della lente frontale dell'obiettivo,
dell'olio di immersione, della lente frontale
del condensatore e del mezzo di montaggio
sono uguali o molto vicini alla stessa.
In questo sistema ideale, un raggio di luce
obliquo può passare attraverso la lente del
condensatore e completamente attraverso il
vetrino del microscopio, l'olio per immersione
e il mezzo di montaggio non soggetti a
rifrazione alle interfacce olio-vetro o mezzo
di montaggio-vetro.
Quando si utilizzano obiettivi acromatici
a immersione in olio ad alto ingrandimento, è talvolta possibile omettere la fase di lubrificazione della lente
superiore del condensatore. Questo perché il diaframma di apertura del condensatore deve spesso essere
ridotto con obiettivi meno corretti per eliminare gli artefatti e fornire immagini ottimali.
La riduzione della dimensione del diaframma riduce il potenziale aumento dell'apertura numerica (fornito dalla
lubrificazione della lente del condensatore), pertanto la perdita di qualità dell'immagine in queste condizioni è
generalmente trascurabile. La microscopia in campo scuro è una tecnica di illuminazione specializzata che
sfrutta l'illuminazione obliqua per migliorare il contrasto nei campioni che non possono essere osservati bene
nelle normali condizioni di illuminazione in campo chiaro.
Tutti noi abbiamo abbastanza familiarità con l'aspetto e la visibilità delle stelle in una notte buia, nonostante le
loro enormi distanze dalla terra. Le stelle possono essere viste a causa del netto contrasto tra la loro debole
luce e il cielo nero.
Lente Frontale
Obiettivo
Coprioggetto
Campione
Lente Frontale
Condensatore
Sistema di immersione
Pagina 41
Olio da Immersione
Olio da
Immersione
omogeneo
Mezzo di
Montaggio
Fig. 21