Inhaltsverzeichnis
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c)
Im Lysepuffer (AL) hat sich
Präzipitat gebildet
d)
Variable Elutionsvolumina
e)
Vakuumdruck von 800–
900 mbar wird nicht
erreicht
f)
Bei Problemen mit dem
automatisierten
Arbeitsablauf
40
Kommentare und Vorschläge
Wiederholen Sie dieses Vorgehen, wenn die QIAamp Mini Spin-Säule weiterhin
verstopft ist.
Wenn das Lysat nach der Zentrifugation noch immer nicht die Membran passiert hat,
verwerfen Sie die Probe und wiederholen Sie Isolierung und Aufreinigung mit neuem
Probenmaterial beginnend bei Schritt 1.
Allgemeine Informationen
Durch wiederholtes Einfrieren und Auftauen könnten sich Kryopräzipitate gebildet
haben. Diese können die QIAamp Mini Spin-Säule blockieren. Verwenden Sie keine
Blutproben, die mehr als 3-mal eingefroren und wieder aufgetaut worden sind.
Gefrorene Proben sind schnell in einem 37 °C warmen Wasserbad unter leichtem
Bewegen aufzutauen, um sicherzustellen, dass der Inhalt gründlich gemischt wird.
Anschließend sind die Proben auf Raumtemperatur (15−25 °C) zu äquilibrieren, bevor
mit dem Verfahren begonnen wird.
Lösen Sie das Präzipitat durch Inkubation des Lysepuffers (AL) bei 56 °C auf.
Wie viel Eluat gewonnen wird, hängt von der Art der Probe ab.
Aufgrund von Elutionspuffer (AE), der von der Spin-Säule nach der Zentrifugation
zurückgehalten wird, kann das gewonnene Eluatvolumen niedriger sein als das
Volumen an auf die Säule aufgetragenem Elutionspuffer.
Geben Sie den Elutionspuffer (AE) auf die Mitte der Membran. Insbesondere bei
kleineren Elutionsvolumina ist es wichtig, den Elutionspuffer (AE) auf die Mitte der
Membran zu dispensieren, um eine optimale Gewinnung von Nukleinsäuren und
Elutionspuffer (AE) zu gewährleisten.
Die Vakuumstation ist nicht fest verschlossen. Drücken Sie nach Einschalten des
Vakuums auf den Deckel des Vakuumverteilers. Überprüfen Sie, ob der Vakuumdruck
erreicht wird. Dichtung des QIAvac-Deckels hat sich abgenutzt. Überprüfen Sie visuell
die Dichtung des Vakuumverteilers und ersetzen Sie sie bei Bedarf.
VacValves haben sich abgenutzt. Entfernen Sie alle VacValves und setzen Sie die
VacConnectors (VC) direkt in die Luer-Aufnahmen. Setzen Sie die QIAamp Mini Spin-
Säulen in die VacConnectors (VC), schließen Sie die Deckel der Säulen und schalten
Sie das Vakuum ein. Überprüfen Sie, ob der Vakuumdruck erreicht wird. Ersetzen Sie
die VacValves, falls erforderlich.
Verbindung mit der Vakuumpumpe ist undicht. Schließen Sie alle Luer-Aufnahmen mit
Luer-Kappen und schalten Sie die Vakuumpumpe ein. Überprüfen Sie, ob der
Vakuumdruck nach Einschalten der Pumpe (und bei geschlossenem Vacuum Regulator-
Ventil) stabil bleibt. Tauschen Sie die Verbindungen zwischen Pumpe und
Vakuumstation aus, falls erforderlich.
Wenn der Vakuumdruck noch immer nicht erreicht wird, ersetzen Sie die
Vakuumpumpe durch eine leistungsstärkere.
Ziehen Sie das QIAcube Connect MDx Benutzerhandbuch (das unter der Registerkarte
„Resources" (Ressourcen) der Produktseite auf
QIAamp DSP DNA Blood Mini Kit Gebrauchsanweisung (Handbuch)
www.qiagen.com
zu finden ist) heran.
06/2022
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